待檢標本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養上清等。

規    格：96T/48T

性    狀：液體

保    存：2-8℃

需要而未提供的試劑和器材

1.  標準規格酶標儀

2.  高速離心機

3.  電熱恒溫培養箱

4.  干凈的試管和Eppendof管

5.  系列可調節移液器及吸頭，一次檢測樣品較多時(shí)，用多通道移液器

6.  蒸餾水，容量瓶等

使用方法
IgG,大鼠免疫球蛋白Gelisa試劑盒代測操作步驟

實(shí)驗開(kāi)始前，各試劑均應平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解)；試劑或樣品稀釋時(shí)，均需混勻，混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗前應預測樣品含量，如樣品濃度過(guò)高時(shí)，應對樣品進(jìn)行稀釋?zhuān)�以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍，計算時(shí)再乘以相應的稀釋倍數。

1.加樣：分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔�？瞻卓准訕悠废♂屢�100μl，余孔分別加標準品或待測樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻，酶標板加上蓋或覆膜，37℃反應120分鐘。為保證實(shí)驗結果有效性，每次實(shí)驗請使用新的標準品溶液。

2.棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時(shí)內配制)，酶標板加上覆膜, 37℃反應60分鐘。

3.溫育60分鐘后，棄去孔內液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，大約400μl/每孔，甩干(也可輕拍將孔內液體拍干)。

4.每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl，酶標板加上覆膜37℃反應60分鐘。

5.溫育60分鐘后，棄去孔內液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干(也可輕拍將孔內液體拍干)。

6.依序每孔加底物溶液90μl，酶標板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內，此時(shí)肉眼可見(jiàn)標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止)。

7.依序每孔加終止溶液50μl，終止反應，此時(shí)藍色立轉黃色。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗結果的準確性，底物反應時(shí)間到后應盡快加入終止液。

8.用酶聯(lián)儀在450nm波長(cháng)依序測量各孔的光密度(OD值)。 在加終止液后立即進(jìn)行檢測。

注意事項
IgG,大鼠免疫球蛋白GELISA試劑盒代測實(shí)驗注意事項：

1.試劑準備：所有試劑都必須在使用前達到室溫，使用后請立即按照說(shuō)明書(shū)要求保存試劑。實(shí)驗操作中請使用一次性的吸頭，避免交叉污染。

2.加樣：加樣或加試劑時(shí)，請注意在吸取標本 / 標準品，酶結合物或底物時(shí)，個(gè)孔與*后一個(gè)孔加樣之間的時(shí)間間隔如果太大，將會(huì )導致不同的 “預孵育"時(shí)間，從而明顯地影響到測量值的準確性及重復性。一次加樣時(shí)間(包括標準品及所有樣品)控制在10分鐘內，如標本數量多，推薦使用多道移液器加樣。

3.孵育：為防止樣品蒸發(fā)，試驗時(shí)將反應板放于鋪有濕布的密閉盒內，酶標板加上蓋或覆膜，以避免液體蒸發(fā)；洗板后應盡快進(jìn)行下步操作，任何時(shí)侯都應避免酶標板處于干燥狀態(tài);同時(shí)應嚴格遵守給定的孵育時(shí)間和溫度。

4.洗滌：洗滌過(guò)程中反應孔中殘留的洗滌液應在濾紙上充分拍干，勿將濾紙直接放入反應孔中吸水，同時(shí)要消除板底殘留的液體和手指印，避免影響*后的酶標儀讀數。

5.試劑配制：Detection A及Detection B在使用前請手甩幾下或少時(shí)離心處理，以使管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。標準品、檢測溶液A工作液、檢測溶液B工作液請依據所需的量配置使用，并使用相應的稀釋液配制，不能混淆。請精確配置標準品及工作液，盡量不要微量配置(如吸取檢測溶液A時(shí)，一次不要小于10μl)，以避免由于不準確稀釋而造成的濃度誤差；請勿重復使用已稀釋過(guò)的標準品、檢測溶液A工作液或檢測溶液B工作液。

6.反應時(shí)間的控制：加入底物后請定時(shí)觀(guān)察反應孔的顏色變化(比如，每隔10分鐘)，如顏色較深，請提前加入終止液終止反應，避免反應過(guò)強從而影響酶標儀光密度讀數。

7.底物：底物請避光保存，在儲存和溫育時(shí)避免強光直接照射。建議檢測樣品時(shí)均設雙孔測定，以保證檢測結果的準確性。

如標本中待測物質(zhì)含量過(guò)高，請先稀釋后再測定，計算時(shí)請*后乘以稀釋倍數。

公司常見(jiàn)產(chǎn)品：

人常見(jiàn)ELISA試劑盒系列

人：IL-1、IL-1α、IL-1β、IL-2、IL-2R、IL-27、IL-23、IL-17、IL-18、IL-9、IL-8、IL-6、IL-5、IL-4、IL-2、IL-13、IL-11、IL-10、IL-12P70、IL-12P40、IFN-ω、IFN-β、IFN-α、 IFN-γ、TNF-β、TNF-α、sICAM-1、LEP、MMP-3等

大鼠常見(jiàn)ELISA試劑盒系列

大鼠：TNF-α、IL-1β、IL-7、IL-32、IL-21、IL-27、IL-23、IFN-γ、TGF-α、TGF-β1等

小鼠常見(jiàn)ELISA試劑盒系列

小鼠：IFN-γ、IL-1α、IL-1β、IL-13、IL-10、IL-11、IL-17、TNF-α、TNF-β、VEGF、TGF-β1等

另有兔、豬、猴、雞、鴨、羊、植物等多種種屬ELISA試劑盒，所有試劑盒經(jīng)過(guò)充分驗證，保證有效且重復性佳。

更新時(shí)間：2024/6/12 9:40:14